中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: FISH做出来信号不太好什么原因？ [打印本页]

作者: 小小猪 时间: 2024-1-2 21:22 标题: FISH做出来信号不太好什么原因？

各位老师，想请教下FISH做出来信号不太好，红色模糊的，绿色更看不清，排除了所有的原因，比如消化环节，加探针环节，洗涤环节完全按操作流程来的，片子dapi 下也没有云雾状，细胞轮廓也完整，但是信号总像蒙了一层薄膜纸样，自己实在找不到原因，希望有老师能赐教，万分感谢

作者: ChenRong 时间: 2024-5-7 09:49

1，供应商：最好的方法市，你应让供应商派技术指导现场看下片子，然后根据观察后的情况用备片让其实验下，看结果会如何，别忘了让他告诉你问题再哪，怎么解决。2，消化：自己也可以摸索的寻找原因，一般情况消化问题出的比较多，你可以做一张大幅增加时间，一张缩短时间
3，切片厚度：你增加切片厚度试试。

4，杂交：时间增加或者二次杂交。

作者: 禾太急 时间: 2024-5-20 11:05 标题: 回复 1# 的帖子

是整批是这样还是其中一张？还是突然这样？原因很多的，方便加我可以交流一下。

作者: xiaojingteng 时间: 2025-5-9 10:12 标题: 回复 3# 的帖子

90%的原因是消化不足导致的。红、绿信号均模糊，是探针杂交不完全，所以信号点不亮。为什么杂交不完全、不彻底呢？DNA周围的蛋白没消化彻底，阻挡了探针与基因的杂交。表现就是信号、背景都像蒙了一层薄膜纸样。而且您可以看一下是不是绿通道背景很重。
另外，您是怎样排除消化环节没问题的？

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://www.dingw.com/bbs/)