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胶原纤维

时间:2007-12-23  作者:丁伟  阅读:32350次

      胶原纤维是三种纤维中分布最广泛,含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内。在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。
    一、苦味酸—酸性品红法 (Van Gieson,1889)   
    试剂配制:
    (一)Weigert氏铁苏木素液
    A液:苏木素                           1g
    无水酒精                               100m1
    B液:30%三氯化铁液                   4ml
    蒸馏水                                 100ml
    纯盐酸                                 lml
    A、B两液需分瓶盛放,A液配制后数天即可用,不宜配制过多,如保存时间过长则染色不良。平时应密封保存,B液配制后立即可用。临用前将A、B两液等量混合。
    (二)Van Gieson氏染液
    A液:  1%酸性品红水溶液
    B液:苦味酸饱和水溶液(约1.2%)
A、B两液分瓶盛放。临用前取A液1份,B液9份混合后使用。
      
 操作方法:
  1. 组织固定于10%甲醛液,常规脱水包埋。
  2.切片脱蜡至水。
  3.用Weigert氏铁苏木素液染5~10分钟。
  4. 流水稍洗。 
  5.1%盐酸酒精迅速分化。 
  6. 流水冲洗数分钟。   
  7.用Van Gieson氏液染1~2分钟。
  8.倾去染液,直接用95%酒精分化和脱水(可放入温箱烤干后,直接透明封片)。
  9. 无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固。
        结果:    
    胶原纤维呈鲜红色,肌纤维,胞质及红细胞黄色,胞核蓝褐色。
     

(二)、Masson 三色染色法
   丽春红酸性品红液: 丽春红 0.7 g ,酸性品红0.3 g,
   蒸馏水99ml,冰醋酸1 ml
   苯胺蓝液: 苯胺蓝2 g ,蒸馏水98 ml,醋酸2 ml 
   亮绿液: 亮绿0.2g ,蒸馏水100 ml,冰醋酸0.2 ml
染色步骤:
1. 切片脱蜡至蒸馏水
2. 苏木素染5~10分钟
3. 盐酸酒精分化
4. 流水蓝化,蒸馏水洗(苏木素可不染)
5. 丽春红酸性品红液中染5~8分钟
6. 蒸馏水洗
7. 1% 磷钼酸中染1~3分钟
8. 不用水洗直接入苯胺蓝液或亮绿液5分钟 (如染色效果不佳,可在冰醋酸内脱色后重染)
9. 水速洗,置60℃温箱中烘干,二甲苯透明,封固
    结果:胶原纤维蓝色(苯胺蓝复染)或绿色(亮绿复染),肌纤维、纤维素红色。

    注意事项:
1.组织用Bouin氏液固定为佳。。
2.用l%磷钼酸处理时可在镜下控制,见肌纤维呈红色,胶原纤维呈淡红色即可。




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
本栏目内容只供网友们学习研究用,不得用于商业行为。

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