一、 苏木素 (1) Harris苏木素(退行性染色): 配方:
苏木素 1 g 无水乙醇 10 ml 蒸馏水 200 ml 钾明矾 20 g HgO 0.5 g
先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把明矾放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木素,煮沸 2 分钟,先加入少量的氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定:以每天100张片的量,可使用半个月左右。
(2)Gill改良苏木素液(进行性染色) : 苏木精 2 g 无水酒精 250 ml 硫酸铝 17.6 g 蒸馏水 750 ml 碘酸钠 0.2 g 冰醋酸 20 ml
先将苏木精溶于无水酒精,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。此液为半氧化进行性苏木素液,染色不需要分化,不会产生沉淀,氧化膜少。
二、伊红 (1)伊红(水溶性) 配方: 伊红 (水溶性) 2 .5 -5g 蒸馏水 500 ml 将水溶性伊红溶于蒸馏水中,然后加浓盐酸10毫升,充分搅拌,静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次,再过滤;将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥,加95%酒精1000毫升,配成饱和液。使用前再用95%的酒精 1:1~2倍稀释,加入1~2%冰醋酸。 此方法具有染色时间快,颜色鲜艳,不容易褪色,使用寿命长等特点。 (2) 伊红(醇溶性) 配方: 伊红 (醇溶性) 2 .5-5g 95%酒精 1000 ml 加冰醋酸至半透明状,冰醋酸过多,可导致染浆时细胞核酸化。 三、盐酸酒精分化液: 浓盐酸 0.5~1 ml 75%酒精 99 ml 四、清洗液: 30%盐酸或者用5%苯酚水溶液浸泡24小时,取出后充分水洗。此法可用于盖玻片或载玻片处理。 |