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常用HE试剂配制

时间:2007-12-23  作者:丁伟  阅读:1405次

一、 苏木素
(1) Harris苏木素(退行性染色):
 配方:
    

 苏木素    1 g      无水乙醇    10 ml
 蒸馏水 200 ml      钾明矾       20 g              
 HgO     0.5 g

先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把明矾放入蒸馏水,加热溶解,再加入备用的苏木素,煮沸 2 分钟,先加入少量的氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以 5% 的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定:以每天100张片的量,可使用半个月左右。

(2)Gill改良苏木素液(进行性染色) :
     苏木精       2  g            无水酒精     250 ml
     硫酸铝     17.6 g            蒸馏水       750 ml
     碘酸钠      0.2 g            冰醋酸       20  ml

    先将苏木精溶于无水酒精,硫酸铝溶于蒸馏水,然后两液混合后加入碘酸钠,最后加入冰醋酸。此液为半氧化进行性苏木素液,染色不需要分化,不会产生沉淀,氧化膜少。

二、伊红
(1)伊红(水溶性)
    配方:
    伊红 (水溶性)         2 .5 -5g   
    蒸馏水                       500 ml
    将水溶性伊红溶于蒸馏水中,然后加浓盐酸10毫升,充分搅拌,静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次,再过滤;将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥,加95%酒精1000毫升,配成饱和液。使用前再用95%的酒精 1:1~2倍稀释,加入1~2%冰醋酸。
    此方法具有染色时间快,颜色鲜艳,不容易褪色,使用寿命长等特点。
(2) 伊红(醇溶性)
      配方:
    伊红 (醇溶性)      2 .5-5g
    95%酒精                  1000 ml
   加冰醋酸至半透明状,冰醋酸过多,可导致染浆时细胞核酸化。
三、盐酸酒精分化液:
  浓盐酸        0.5~1 ml
  75%酒精         99 ml
四、清洗液:
   30%盐酸或者用5%苯酚水溶液浸泡24小时,取出后充分水洗。此法可用于盖玻片或载玻片处理。
                   
        




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
本栏目内容只供网友们学习研究用,不得用于商业行为。

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