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粘液染色

时间:2007-12-23  作者:丁伟  阅读:17688次

    过碘酸-Schiff(PAS)染色法
  试剂配制:
碱性品红 1 g ,活性炭 2 g ,当量盐酸 20 ml ,偏重亚硫酸钠 1.5 g
Schiff试剂配制:
1. 碱性品红1g,放入200毫升蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。
2. 冷却至50℃时过滤,滤液中加入当量盐酸20毫升。
3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。
4. 加活性炭2 g,摇晃,过滤,以无色为最佳。棕色瓶,4℃冰箱保存。

所谓Schiff’s试剂冷配法,就是将热配法的配方,依次加入容器,用震荡器震荡2小时,然后加活性炭1克,震荡10分钟,过滤便可使用。

染色步骤:
1. 切片脱蜡至蒸馏水。
2. 1%过碘酸水溶液5-10分钟。
3. 蒸馏水洗多次。
4. Schiff液10-15分钟。
5. 0.5%偏重亚硫酸钠 (钾)水溶液洗2次(1-2分钟)
6. 流水冲洗10分钟。
7. 苏木素复染。(1-2分钟)
8. 酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
结果:中性粘液呈红色。

阿尔辛蓝(AB)染色法(pH2.5)
  试剂配制:爱先蓝液: 爱先蓝8GX 1g ,蒸馏水 97 ml,冰醋酸 3 ml
     核固红液: 核固红 0.1g,硫酸铝 5g,蒸馏水  97ml
染色步骤:
1. 切片脱蜡至蒸馏水。
2. 爱先蓝液染10~20分钟
3. 蒸馏水洗
4. 核复染(核固红5分钟),水洗
5. 脱水,透明,封固。
 结果:唾液酸及弱硫酸化粘液及一般粘液呈蓝色。常用于确定胞浆内空泡的性质,特别是当细胞呈现印戒样特征时。
 

阿尔辛蓝过碘酸雪夫(AB-PAS)染色法
试剂配制:
爱先蓝液: 爱先蓝8GX 1g ,蒸馏水 97 ml,冰醋酸 3 ml
核固红液: 核固红 0.1g,硫酸铝 5g,蒸馏水  97ml
碱性品红 1 g ,活性炭 2 g ,当量盐酸 20 ml ,偏重亚硫酸钠 1.5 g
Schiff试剂配制:
1. 碱性品红1g,放入200ml蒸馏水中,煮沸,搅拌,充分溶解。
2. 冷却至50℃时过滤,滤液中加入当量盐酸20ml。
3. 加偏重亚硫酸钠 1.5 g,置于暗处过夜。
4. 加活性2 g,摇晃,过滤,以无色为最佳。棕色瓶,4℃冰箱保存。
染色步骤:
1. 切片脱蜡至蒸馏水。
2. 爱先蓝液染10~20分钟
3. 蒸馏水洗
4. 1%过碘酸水溶液5-10分钟。
5. 蒸馏水洗多次。
6. Schiff液10-15分钟。
7. 流水冲洗10分钟。
8. 酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
结果:中性粘液呈红色,酸性粘液物质呈蓝色。中性与酸性粘液的混合物质呈紫红色。

 Southgate胭脂红染色
试剂配制:
1.Southgate贮备液:胭脂红 1g,无水酒精 50ml,蒸馏水 50ml升,氢氧化铝 1 g,无水氯化铝 0.5 g
    先将无水酒精和蒸馏水1:1混合,依次加入试剂,搅拌,水浴中煮沸3分钟,冷至室温过滤,并用50%酒精加至总量100ml,磨纱瓶冰箱保存。
2.Southgate稀释液:用前取10ml贮存液加蒸馏水40ml。
3.马休黄液:将马休黄0.5 g溶于100ml95%酒精中,再加入磷钨酸2 g。
染色步骤:
1. 切片脱蜡至水
2. 苏木素染5~10分钟
3. 水洗,1%盐酸酒精分化
4. 水洗,蓝化
5. Southgate稀释液染30分钟
6. 水洗
7. 95%酒精洗二次
8. 马休黄液复染15~20分钟(这一步可不染)
9. 水稍洗
10. 脱水,透明,封固
结果:酸性粘液及新型隐球菌荚膜呈红色,其他组织黄色。
粘蛋白染色的应用:
1. 鉴定粘液性肿瘤、印戒细胞的性质。
2. 观察慢性气管炎粘液腺的活动状态。
3. 观察基底膜结构及完整性。
4. 鉴别肠上皮化生的类型。




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
本栏目内容只供网友们学习研究用,不得用于商业行为。

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