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免疫组织化学染色方法(直接法)

时间:2007-12-23  作者:丁伟  阅读:31971次

(1)组织切片常规脱蜡入水。
   (2)胰酶或胃蛋白酶消化,37℃ 30分钟点。
(3)水洗。
   (4)0.3%H2O2甲醇液:阻断内源性过氧化物酶(198毫升甲醇或水+2毫升30% H2O2)20分钟。(冰冻切片、细胞涂片从此步骤开始)
   (5)水洗后经PBS洗2-3次。
   (6)滴加正常血清37 ℃,20分钟。
   (7)甩去血清,加酶标记抗体,37℃ 30分钟。置温盒内。
   (8)PBS洗3次。
   (9)显色。显微镜下观察控制呈色反应,以结果清晰,背景无非特异性染色为度。
   (10)自来水充分冲洗。
   (11)必要时苏木素复染胞核。
   (12)封片。若用DAB呈色,需经酒精脱水,二甲苯透明,树胶封片。若用AEC等则不能用酒精脱水,用吸水纸去周围组织多余的水份,直接将水溶性封片剂封片。




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
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