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消化道脱落细胞样本的制备

时间:2007-12-23  作者:丁伟  阅读:17716次

1、食道拉网法:
一般采用塑料树胶管采集器,管长约65cm、横径0.3cm,每5cm有一刻度。管腔的一端为通入气囊用于充气,另一端接通气管连注射器。气囊套以细棉线或线网作为擦取表面细胞之用。
    拉网检查时,受检者晨起禁食、水,禁钡透(需透视定位者,应隔24小时后进行拉网检查)。检查前用空针管充气检查气囊是否漏气,并确定容气量。吞网时受检者连续吞咽,检查者将网囊徐徐送下,到达贲门后充气,上下拉动以采取上皮细胞,同是左手持针管控制压力,右手持拉网管缓缓上移,到距门齿20cm处,放气取出网囊,观看网囊上有无出血点或白色颗粒,在这些部位直接涂片,立即放入95%酒精固定。
    注意事项:食管拉网检查前,应首先了解病史,拉网前须取下受检者的活动假牙。拉网时若发现病人剧咳憋气,应立即终止拉网检查。拉网检查后嘱患者进温水饮食。急性上呼吸道感染者,最好康复后再拉网检查;近期有上消化道活动性出血、肝硬化、食管静脉曲张者,绝对禁止拉网;对严重心脏病和高血压病人、哮喘及肺功能差的患者、以及晚期肿瘤有穿孔危险者,一般不做拉网检查。


2、食道冲洗法:
(1) 操作前患者已经禁食8小时以上,并且前晚晚餐进软食。
(2) 经口手插入鼻导管至刻度约22英英寸标记处,不能用润滑剂。
(3) 尽可能吸出食道和胃内的残留物,并用盐水冲洗,丢弃。
(4) 嘱患者缓慢喝下100ml冷的生理盐水,与此同时,连续吸出液体,将吸出的液体放在100ml冰浴的容器中,标记。
(5) 将鼻导管下插3-5cm,缓慢将50ml冷生理盐水注入管中,并立即回吸,将液体放入500mL冰浴的容器中,标记。此时,患者应该屏住呼吸,可增加回收的量。
(6) 每次将鼻导管下插3-5cm,并重复步骤5,直至鼻导管刻度标记3英寸处。
(7) 将收集的样本离心,取沉淀物涂片,固定,苏木素-伊红染色。


3、胃冲洗法:
(1) 操作前患者已经禁食8小时以上,并且前晚晚餐进软食,充许喝水。
(2) 先让患者喝入300-400ml生理盐水(或林格液和各种含酶的磷酸缓冲液:α-糜蛋白酶、胰蛋白酶、番木瓜酶等),经口插入胃管,管下到60cm左右,患者平卧或左侧位卧,用50ml注射器反复加压冲洗,同时转动体位,吸出液体(为第一液)和胃内残留物,丢弃。
(3) 嘱患者摆正身位,快速加压向胃里注入300-400ml冷生理盐水或林格液,反复加压冲洗,同时转动体位,吸出液体为第二液,立即将液体放入500mL冰浴的容器中。
(4) 嘱患者变换体位(左侧位、右侧位和床上翻滚),于每个体位反复注入和抽吸进行加压冲洗,抽出液体放入500mL冰浴的容器中。
(5) 离心, 转速2000/分,5分钟。取沉淀物涂片,立即固定于95%酒精中。
(6) 苏木素-伊红染色(见呼吸系统样本的制备一节)
   上述方法如用电动洗胃机代替人工冲洗,阳性率会更高。


4、各种内窥镜直视下细胞刷拭法:
(1) 各种内窥镜(胃镜、十二指肠镜、胆道镜等),插入细胞刷,至病灶处,在直视下对病变部位进行刷拭,转动细胞刷,尽可能使刷头各个面均能接触至病变部位。
(2) 将细胞刷轻轻取出,在载玻片上涂片,立即固定于95%酒精中。
(3) 也可将细胞刷洗于液基薄层细胞固定液或生理盐水中,行液基薄层细胞处理或离心涂片。
(4) 苏木素-伊红染色(见呼吸系统样本的制备一节)


5、十二指肠-胰腺-胆管冲洗法:
(1) 患者在X光透视检查定位下行双腔管插管。
(2) 将100-150ml冷生理盐水注入双腔管十二指肠一边,吸出并弃去液体。
(3) 再将100ml冷生理盐水注入,吸出液体放入冰浴的容器中。
(4) 离心, 转速2000/分,5分钟。取沉淀物涂片,立即固定于95%酒精中。
(5) 苏木素-伊红染色(见呼吸系统样本的制备一节)




参考文献:
1、王伯沄,李玉松,黄高升,张远强《病理学技术》
2、凌启波《实用病理特殊染色和组化技》
3、刘介眉等《病理组织染色的理论方法和应用》
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