中华病理技术论坛 - Powered by Discuz! Board

标题: 伊红不着色可能是什么原因？ [打印本页]

作者: luo 时间: 2011-7-12 09:16 标题: 伊红不着色可能是什么原因？

是以前进的25克装的水溶性伊红，配置方法为伊红0.5克，蒸馏水75毫升，95%的酒精25毫升，以前用的还可以，但是最近反复配了几次，着色一直不是很好，和技术员一起找原因，直到现在也么有答案。莫非是试剂时间长过期了？所以最近又重新购进了一些，还没有到货，大家看看可能是什么原因？

作者: dingwei 时间: 2011-7-12 10:56

我们以前水溶性伊红都是酸化后再配。http://www.dingw.com/detail-44.html，直接配加几滴冰醋酸试一下看看能否改善。

作者: luo 时间: 2011-7-12 21:58

谢谢丁老师，这个以前就没有看懂，现就我的理解看看对不对：
这个是分两部分，总量上用伊红2.5克，蒸馏水500毫升

1 将2.5克伊红用500毫升的一部分溶解，同时加浓盐酸10毫升搅拌，静止过夜过滤。
2 过滤完之后，再用500毫升的一部分蒸馏水过滤两次，然后把沉淀物和滤纸一起放入烤箱内干燥。
3 将干燥的沉淀物用95%的乙醇配称饱和液。
4 使用前把第3步的饱和饱和液1：1到1：2倍稀释，然后加入1%~2%的冰醋酸。

但是这样理解，溶解后的过滤液就没有用了，全倒掉吗？那样的话，500毫升蒸馏水就没有必要了。

作者: xkj2797xkj 时间: 2011-7-12 23:23

醇溶性伊红：
0.5%伊红酒精液：醇溶性伊红0.5g+95%酒精100ml
将伊红溶解于酒精中，加冰醋酸1滴。染色时间1-3分钟。（建议你用这个）

作者: dingwei 时间: 2011-7-13 08:09

引用:

原帖由 luo 于 2011-7-12 21:58 发表
谢谢丁老师，这个以前就没有看懂，现就我的理解看看对不对：
这个是分两部分，总量上用伊红2.5克，蒸馏水500毫升

1 将2.5克伊红用500毫升的一部分溶解，同时加浓盐酸10毫升搅拌，静止过夜过滤。
2 过滤完之后， ...

理解有点差异：
1 将2.5克伊红用500毫升蒸馏水溶解，同时加浓盐酸10毫升搅拌，静止过夜过滤。
2 过滤完之后，沉淀物再用蒸馏水洗两次（不在500ML内，目的是洗去沉淀物内过多的盐酸 ），过滤，然后把沉淀物和滤纸一起放入烤箱内干燥。
3 将干燥的沉淀物用95%的乙醇配称饱和液。
4 使用前把第3步的饱和饱和液1：1到1：2倍稀释，然后加入1%~2%的冰醋酸（可加也可不加）。
用水溶性伊红配很麻烦，需要酸化变成醇溶性，建议直接买醇溶性伊红。

作者: luo 时间: 2011-7-13 08:37

谢谢丁老师，原来以为前面的水溶液也要保留呢，看来是废弃了，仅仅是为了要沉淀物，为了把水溶性的变成醇溶性的，我再试试。

作者: flyaqmt 时间: 2011-7-13 08:39

哦，原来水溶性的要酸化成醇溶性的才能用，我们一直有蒸馏水配来用

作者: luo 时间: 2011-7-13 12:00

已经沉淀了，现在明白了，原来添加盐酸之后，溶液变成了乳浊液一样的东西，静止下自然分成上清液和下面的絮状沉淀。

作者: xinfangjie315 时间: 2011-7-20 21:40

学习！感谢丁老师。

作者: gagawow 时间: 2011-7-25 23:21

学习了！
我们科室就是2.5克的曙红Y加蒸馏水500ML之后用冰醋酸调一下就用了。

作者: chenyaqin 时间: 2011-7-26 11:06 标题: 一样

引用:

原帖由 gagawow 于 2011-7-25 23:21 发表
学习了！
我们科室就是2.5克的曙红Y加蒸馏水500ML之后用冰醋酸调一下就用了。

我们也是这么配的，没丁老师说的那么复杂呢。水溶性500ml才加1~2滴冰醋酸，醇溶性直接用80%的乙醇加2.5g的伊红就完事了。

作者: luo 时间: 2011-7-27 14:48

丁老师的方法很管用，现在染色非常好，但是疑问就是不知道为什么原来的方法不着色。

作者: bawanming 时间: 2011-8-11 18:54

我们科也是，直接用蒸馏水溶解后就用了，不知道有啥区别？

作者: 新手妈妈 时间: 2011-8-11 22:46

水溶性直接配的水洗和过梯度酒精时容易褪色，要把握的好才行，分化过度就要重染了，醇溶的可以分化时间长点

作者: luo 时间: 2011-8-12 16:26

引用:

原帖由 新手妈妈 于 2011-8-11 22:46 发表水溶性直接配的水洗和过梯度酒精时容易褪色，要把握的好才行，分化过度就要重染了，醇溶的可以分化时间长点

谢谢

作者: xj_yong 时间: 2011-9-3 10:37

呵呵呵呵

我科里也出现过这样的问题，那是我染色时二甲苯脱蜡后忘过梯度酒精了，现在想起来还很可笑呢。

欢迎光临中华病理技术论坛 (http://www.dingw.com/bbs/)